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發酵罐裝入溶積60%的培養基效果怎么樣

發布時間:2019.05.24     瀏覽次數:     新聞來源://www.mmcpd.icu/

發酵罐裝入溶積60%的培養基(成分同種子培養基)后,將發酵罐放入滅菌釜內,在115℃下,滅菌20min。當滅菌完成后,溫度降到60℃以下時,打開滅菌釜,確認發酵罐上所連接的管路完好后,將罐去除。安裝pH及溶解氧等檢測裝置,注意各接線口不要出現差錯。由于操作過程要和水打交道,故線路連接一定要注意安全,要特別注意防止漏電。發酵罐滅菌排氣管為玻璃管,內裝有棉花,以保證蒸汽能自由出入發酵罐,同時不會出現染菌現象。取樣口上連接一段硅膠管,在硅膠管上安裝節流夾,以防止培養基在滅菌是流出。

1.盡快將通氣管接好,確認排氣口正常后,以0.3-0.5L/min通入空氣。接通冷卻水管路,開攪拌在低速下進行培養基的冷卻。取樣與分析方法 自培養操作開始起,每3h取一次樣。取樣時,將取樣管口流出的最初15ml左右培養液作為廢液,取隨后流出的培養液10ml,在OD505下測定吸光度。所得數值基于已制得的菌體量與吸光度之間的曲線,換算出菌體濃度。

2.發酵菌的空消技術發酵罐的清洗 打開罐底排污閥,用冷水沖洗罐壁,如壁內壁有沉積物,操作人員必須下罐進行人工鏟除,否則易包藏雜菌成為污染源。進罐清洗必須兩人進行,一人進罐清洗,一人在外監護。同時與罐體相連的取樣管道,進料管道,排污管道及有關閥門都要通水沖洗干凈,最好通以沸水,以提高洗滌效率,洗完后蓋上入孔蓋。發酵罐空消操作打開罐頂各排汽閥,開三路進汽(罐底、風管、取樣管)??際?,蒸汽以下進上出為主,蒸汽由罐底和風管進入,由罐頂所有排汽閥排出冷空氣。

3.在蒸汽排出時,即關閉各閥門,稍開排汽閥,當罐壓上升到時,開罐頂各排汽閥,排汽歷時 15-20min,蒸汽改為上進下出為主,即關閉底部蒸汽閥,關小進風管汽閥,蒸汽主要從取樣管進,連消進料管進入,空消過程中蒸汽應將兩只大罐間倒種管道、壓料進風管道、接種管道以及各排汽閥打開,排汽消毒(兩個沖視鏡閥開啟短暫時間即可)。

4.保壓時間到,關蒸汽閥,排汽到罐壓為0kgf/cm2待進料。分過濾器滅菌 開啟使用時,用從空氣壓站出來的常溫空氣對分過濾器吹風24h左右,檢查無菌,即可使用。以后如果不使用,也必須保持分過濾器通常溫空氣,以免染菌。酵罐的實消技術進料? 空消完畢,開始進料,進料約2/3體積時,開攪拌。由于加熱時物料糊化膨脹,故先不定容。當溫度達到70℃時定容。

5.液化底路直接進蒸汽加熱至75℃左右,關蒸汽,加入用50℃水調勻的α-淀粉酶,嚴防酶結塊,根據生產需要,調整加入量,從進風管通入少量空氣,翻騰10-15min,關閉進氣。實消 用水沖洗入孔蓋,蓋好蓋子進行實消,先將蒸汽管道內的殘存水放完,然后通三路蒸汽,一路罐底,一路進風管,一路取樣管,同時打開罐頂所有排汽閥門,小旋塞及壓力表下的排汽旋塞,讓蒸汽排出,先大后小,待罐壓上升到溫度121℃時,逐步關小各排汽閥門,保溫保壓25-30min。 保壓時間到,關蒸汽,此時應即從分過濾器進無菌空氣,開排氣閥,關閉罐頂的所有閥門,開冷卻水對發酵罐進行降溫,待溫度冷至35℃左右進行接種。

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